УДК 615.28:615.01]:579
DOI: https://doi.org/10.52540/2074-9457.2023.1.71
Р. В. Кравченко, С. Э. Ржеусский
АДАПТАЦИЯ МЕТОДА «ШАХМАТНОЙ ДОСКИ» ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К КОМБИНАЦИЯМ АНТИСЕПТИКОВ
Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет,г. Витебск, Республика Беларусь
Целью данной работы было адаптирование метода «шахматной доски» для определения чувствительности Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus agalactiae к комбинациям тетраметилендиэтилентетрамина, полигексаметиленгуанидина гидрохлорида, хлоргексидина биглюконата, фурацилина, диметилсульфоксида, мирасептина. Фракционную подавляющую концентрацию определяли в сериях из 3 повторений в П-образных культуральных планшетах с крышкой на 96 лунок в формате «шахматной доски» (поле 8 на 8). Установлено, что по отношению ко всем изученным микроорганизмам аддитивным совместным антимикробным действием обладает комбинация тетраметилендиэтилентетрамина и полигексаметиленгуанидина гидрохлорида. Показано, что по отношению к Klebsiella pneumonia аддитивным действием обладает комбинация хлоргексидина биглюконата и фурацилина. По отношению к Staphylococcus aureus аддитивным действием обладают комбинации фурацилина и полигексаметиленгуанидина гидрохлорида, фурацилина и хлоргексидина биглюконата, фурацилина и мирасептина. По отношению к Candida albicans аддитивным действием обладает комбинация тетраметилендиэтилентетрамина и хлоргексидина биглюконата. Диметилсульфоксид не проявляет аддитивного совместного действия ни с одним из антисептиков по отношению к изученным микроорганизмам. Ни одна из исследованных комбинаций не проявляет синергического или антагонистического совместного действия по отношению к изученным микроорганизмам. Определение антимикробной активности гелей тетраметилендиэтилентетрамина, полигексаметиленгуанидина гидрохлорида и их комбинаций проводили методом диффузии в агар. Комбинация тетраметилендиэтилентетрамина и полигексаметиленгуанидина гидрохлорида в виде мягкой лекарственной формы обладает более выраженным антимикробным действием по отношению к грамположительным микроорганизмам. Сделан вывод о возможности использования метода «шахматной доски» для определения чувствительности микроорганизмов к комбинациям антисептиков, которые могут быть применены в стоматологической и хирургической практике.
Ключевые слова: антисептик, комбинированная антимикробная активность, аддитивное совместное действие.
SUMMARY
R. V. Krauchanka, S. E. Rzheussky
ADAPTATION OF THE "CHESSBOARD" METHOD FOR DETERMINING MICROORGANISMS SENSITIVITY TO THE COMBINATIONS OF ANTISEPTICS
The aim of this work was to adapt the "chessboard" method for determining Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus agalactiae sensitivity to tetramethylenediethylene tetramine, polyhexamethylene guanidine hydrochloride, chlorhexidine bigluconate, furaciline, dimethyl sulfoxide, miraseptin combinations. The fractional suppressive concentration was determined in the series of 3 repetitions in U-shaped cultural plates with a lid for 96 holes in the "chessboard" format (field 8 by 8). It was found that in relation to all the microorganisms studied the combination of tetramethylenediethylentetramine and polyhexamethylene guanidine hydrochloride had an additive joint antimicrobial effect. It has been shown that chlorhexidine bigluconate and furacillin combination has an additive effect in relation to Klebsiella pneumonia. Furacilin and polyhexamethylene guanidine hydrochloride, furacilin and chlorhexidine bigluconate, furacilin and miraseptin сombinations have an additive effect in relation to Staphylococcus aureus. Tetramethylenediethylentetramine and chlorhexidine bigluconate combination has an additive effect in relation to Candida albicans. Dimethyl sulfoxide does not exhibit additive joint action with any antiseptic in relation to the microorganisms studied. None of the combinations studied shows synergistic or antagonistic joint action in relation to the microorganisms studied. Antimicrobial activity determination of tetramethylenediethylentetramine, polyhexamethylene guanidine hydrochloride gels and their combinations was conducted by the diffusion method into agar. Tetramethylenediethylentetramine and polyhexamethylene guanidine hydrochloride combination in the soft dosage form has a more pronounced antimicrobial effect against gram-positive microorganisms. The conclusion is made about the possibility of using the "chessboard" method to determine microorganisms sensitivity to antiseptics combinations that can be used in stomatological and surgical practice.
Keywords: antiseptic, combined antimicrobial activity, additive joint action.
ЛИТЕРАТУРА
1. Чувствительность и формирование устойчивости к антисептикам и дезинфектантам у возбудителей внутрибольничных инфекций / И. А. Дятлов [и др.] // Бактериология. – 2017. – Т. 2, № 2. – С. 48–58.
2. Development of antiseptic adaptation and cross-adapatation in selected oral pathogens in vitro / T. Verspecht [et al.] // Sci. rep. – 2019. – Vol. 9, N 1. – P. 1–13.
3. Кравченко, Р. В. Анализ рынка стоматологических мягких лекарственных средств / Р. В. Кравченко, С. Э. Ржеусский // Вестн. фармации. – 2020. – № 1. – С. 37–42.
4. Synergy tests by E test and checkerboard methods of antimicrobial combinations against Brucella melitensis / G. Orhan [et al.] // J. of clinical microbiology. – 2005. – Vol. 43, N 1. – P. 140–143.
5. Doern, C. D. When does 2 plus 2 equal 5? A review of antimicrobial synergy testing / C. D. Doern // J. of clinical microbiology. – 2014. – Vol. 52, N 12. – P. 4124–4128.
6. Кравченко, Р. В. Изучение антимикробной активности ряда антисептиков / Р. В. Кравченко, С. Э. Ржеусский // Вестн. фармации. – 2022. – № 2. – С. 77–81.
7. Государственная фармакопея Республики Беларусь: в 2 т. : введ. в действие с 1 янв. 2013 г. приказом М-ва здравоохранения Респ. Беларусь от 25.04.2012 г. № 453. – Т. 1: Общие методы контроля качества лекарственных средств / М-во здравоохранения Респ. Беларусь, Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении ; [под общ. ред. А. А. Шерякова]. – Молодечно: Победа, 2012. – 1220 с.
8. Гинзбург, А. И. Статистика / А. И. Гинзбург. – Санкт-Петербург: Питер, 2002. – 128 с.
REFERENCES
1. Diatlov IA, Detusheva EV, Mitsevich IP, Detushev KV, Podkopaev IaV, Fursova NK. Sensitivity and formation of resistance to antiseptics and disinfectants in causative agents of nosocomial infections. Bakteriologiia. 2017;2(2):48–58. doi: 10.20953/2500-1027-2017-2-48-58. (In Russ.)
2. Verspecht T, Herrero ER, Khodaparast L, Khodaparast L, Boon N, Bernaerts K et al. Development of antiseptic adaptation and cross-adapatation in selected oral pathogens in vitro. Sci Rep. 2019;9(1):1–13. doi: 10.1038/s41598-019-44822-y
3. Kravchenko RV, Rzheusskii SE. Market Analysis of Dental Soft Medicines. Vestn farmatsii. 2020;(1):37–42. (In Russ.)
4. Orhan G, Bayram A, Zer Y, Balci I. Synergy tests by E test and checkerboard methods of antimicrobial combinations against Brucella melitensis. J. of clinical microbiology. J Clin Microbiol. 2005;43(1):140–3. doi: 10.1128/JCM.43.1.140-143.2005
5. Doern CD. When does 2 plus 2 equal 5? A review of antimicrobial synergy testing. J Clin Microbiol. 2014;52(12):4124–8. doi: 10.1128/JCM.01121-14
6. Kravchenko RV, Rzheusskii SE. Study of the antimicrobial activity of a number of antiseptics. Vestn farmatsii. 2022;(2):77–81. doi: 10.52540/2074-9457.2022.2.77. (In Russ.)
7. Ministerstvo zdravookhraneniia Respubliki Belarus', Tsentr ekspertiz i ispytanii v zdravookhranenii. State Pharmacopoeia of the Republic of Belarus: v 2 t. Т. 1. General methods of quality control of medicines. Sheriakov AA, redactor. Molodechno, RB: Pobeda; 2012. 1220 s. (In Russ.)
8. Ginzburg AI. Statistics. Sankt-Peterburg, RF: Piter; 2002. 128 s. (In Russ.)
Адрес для корреспонденции:
210009, Республика Беларусь,
г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,
УО «Витебский государственный ордена
Дружбы народов медицинский университет»,
кафедра менеджмента и маркетинга фармации,
тел. раб.: +375298154190,
e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript.,
Кравченко Р. В.
Поступила 17.01.2023 г.