УДК 615.451.16:615.322
DOI: https://doi.org/10.52540/2074-9457.2025.3.42
Скачать статью

 

А. А. Климович, О. С. Игнатовец, Д. П. Сошко 

Белорусский государственный технологический университет, г. Минск, Республика Беларусь

 

Освоение и интеграция новых лекарственных растений в клиническую практику требуют глубокого изучения их качественного и количественного компонентного состава. В цветках пупавки благородной (Chamaemelum nobile L.), относящейся к ценным лекарственным растениям, идентифицированы различные классы биологически активных веществ, среди которых особый интерес представляют флавоноиды благодаря их антиоксидантным, противовоспалительным и кардиопротекторным свойствам. Целью данного исследования являлась разработка и валидация методики количественного определения флавоноидов методом дифференциальной спектрофотометрии в цветках пупавки благородной.

В исследовании использовались воздушно-сухие цветки пупавки благородной, заготовленные на территории Республики Беларусь. Для количественного определения флавоноидов в цветках пупавки благородной разработана дифференциально-спектрофотометрическая методика, основанная на комплексообразовании с хлоридом алюминия. Экспериментально подобраны оптимальные условия: объемное соотношение водно-спиртового экстракта цветков пупавки благородной, объема 2%-го водно-спиртового раствора хлорида алюминия и продолжительность реакции. Количественное содержание флавоноидов рассчитано относительно стандартного образца цинарозида. Соответствие разработанной методики аналитическим требованиям подтверждено в ходе валидации по ключевым характеристикам: линейности, правильности, прецизионности, специфичности. Установлено, что общая концентрация флавоноидов в цветках пупавки благородной, независимо от года культивирования, составляет более 5,5% в пересчете на абсолютно сухое сырье.

Ключевые слова: флавоноиды, Chamaemelum nobile L., пупавка благородная, валидация, цинарозид, дифференциальная спектрофотометрия.

 

SUMMARY

A. Klimovich, O. S. Ignatovets, D. P. Soshko

DEVELOPMENT AND VALIDATION OF THE ASSAY METHOD OF FLAVONOIDS IN FLOWERS OF CHAMAEMELUM NOBILE (L.) ALL.

The development and integration of new medicinal plants into clinical practice require a thorough study of their qualitative and quantitative composition. Various classes of biologically active substances have been identified in the flowers of the anthemis nobilis (Chamaemelum nobile L.), which belongs to valuable medicinal plants, among which flavonoids are of particular interest due to their antioxidant, anti-inflammatory, and cardioprotective properties. The purpose of this study was to develop and validate a technique for the quantitative determination of flavonoids by differential spectrophotometry in anthemis nobilis flowers.

The study used air-dried anthemis nobilis flowers harvested on the territory of the Republic of Belarus. A differential spectrophotometric technique based on complexation with aluminum chloride has been developed for the quantitative determination of flavonoids in anthemis nobilis flowers. Optimal conditions were experimentally selected: the volume ratio of the water-alcohol extract of anthemis nobilis flowers and the volume of a 2% water-alcohol solution of aluminum chloride and the duration of the reaction. The quantitative content of flavonoids was calculated relative to the standard sample of сynaroside. The compliance of the developed methodology with the analytical requirements was confirmed during validation according to key characteristics: linearity, correctness, precision, specificity. It has been established that the total concentration of flavonoids in the flowers of the anthemis nobilis, regardless of the year of cultivation, is more than 5.5% in terms of absolutely dry matter raw material.

Keywords: flavonoids, Chamaemelum nobile L., anthemis nobilis, validation, сynaroside, differential spectrophotometry.

 

ЛИТЕРАТУРА

  1. Assessment report on Chamaemelum nobile (L.) All., flos / European Medicines Agency, Committee on Herbal Medicinal Products. – London, 2010. – P. 1–19.
  2. Адамцевич, Н. Ю. Влияние параметров экстракции на выход флавоноидов из листьев воробейника лекарственного (Lithospermum officinale L.) / Н. Ю. Адамцевич, В. С. Болтовский, В. В. Титок// Весці Нацыянальнай акадэміі навук Беларусі. Серыя біялагічных навук. – 2020. – Т. 65, № 4. – С. 402–411. – DOI: 10.29235/1029-8940-2020-65-4-402-411.
  3. Antimicrobial Capacity of Plant Polyphenols against Gram-positive Bacteria: A Comprehensive Review / F. J. Alvarez-Martínez, E. Barrajon-Catalan, J. A. Encinar [et al.] // Current medicinal chemistry. – 2020. – Vol. 27, N 15. – P. 2576–2606. – DOI: 10.2174/0929867325666181008115650.
  4. Алексашина, С. А. Сравнительное изучение антиоксидантной активности фенольных соединений и флавоноидов цветков липы сердцевидной (TiIia cordata Mill.), шалфея лекарственного (Salvia officinalis L.), донника лекарственного (Melilotus officinalis L.), листьев смородины (Ribes nigrum folia), земляники лесной (Fragaria vesca L.), винограда (Vitis labrusca), произрастающих в Самарском регионе / С. А. Алексашина, H. В. Макарова // Химия растительного сырья. – 2019. – № 3. – С. 153–159. – DOI: 10.14258/jcprm.2019034623.
  5. Evaluation of burn wound healing potential of aqueous extract of Morus alba based cream in rats / N. Bhatia, A. Singh, R. Sharma [et al.] // The Journal of Phytopharmacology. – 2014. – Vol. 3, N 6. – P. 378–383. – DOI: 10.31254/phyto.2014.3601.
  6. Evaluation of the wound healing potential of isoquercetin-based cream on scald burn injury in rats / N. Bhatia, G. Kaur, V. Soni [et al.] // Burns and trauma. – 2016. – Vol. 4. – P. 1–8. – DOI:10.1186/s41038-016-0032-1.
  7. Effects and mechanisms of total flavonoids from Blumea balsamifera (L.) DC. on skin woundin rats / Y. Pang, Y. Zhang, L. Huang [et al.] // lnternational journal of molecular sciences. – 2017. – Vol. 18, N 12. – P. 2766–2778.  – DOI: 10.3390/ijms18122766.
  8. Климович, А. А. Определение оптимальных параметров экстракции флавоноидов из цветочной массы пупавки благородной (Сhamaemelum nobile (L.) All.) / А. А. Климович, Н. Ю. Адамцевич, О. С. Игнатовец // Вестник фармации. – 2023. – № 3. – С.30–38. – DOI: 10.52540/2074-9457.2023.3.30.
  9. Зверев, Я. Ф. Флавоноиды глазами фармаколога. Особенности и проблемы фармакокинетики / Я. Ф. Зверев // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. – 2017. – Т. 15, № 2. – С. 4–11. – DOI:10.17816/RCF1524-11.
  10. Разработка и валидация методики количественного определения флавоноидов в листьях Lithospermum officinale (Boraginaceae) / Н. Ю. Адамцевич, Е. И. Закржевская, Е. В. Феськова [и др.] // Растительные ресурсы. – 2022. – Т. 58, № 1. – С. 100–108. – DOI:10.31857/S0033994622010034.
  11. Разработка и валидация методики количественного определения суммы флавоноидов в жидком и сухом экстрактах растительной композиции / М. А. Джавахян, М. Г. Токарева, Н. Б. Фадеев [идр.] // Вопросы обеспечения качества лекарственных средств. – 2021. – № 2. – С. 12–22. – DOI: 10.34907/JPQAI.2021.26.35.003.
  12. Модификация методики количественного определения флавоноидов в траве золотарника канадского (Solidago canadensis L.) / А. Н. Кузьменко, О. В. Нестерова, Ф. Ш. Сулейманова [идр.] // Вестник Московского университета. Сер. 2. Химия. – 2019. – Т. 60, №. 1. – С. 49–54. – DOI:10.3103/s0027131419010061.
  13. Проценко, M. A. Разработка и валидация методики количественного анализа фенольных соединений и флавоноидов в экстрактах из высших грибов / M. A. Проценко, M. A. Костина // Химия растительного сырья. – 2015. – № 3. – С. 117–126. – DOI: 10.14258/jcprm.201503822.
  14. Марахова, А. И. Применение принципа сквозной стандартизации в анализе флавоноидов травы пустырника и препаратов на его основе / А. И. Марахова, А. А. Сорокина, Я. М. Станишевский // Разработка и регистрация лекарственных средств. – 2016. – № 1. – С. 150–154.
  15. Производство лекарственных средств. Валидация методик испытаний = Вытворчасць лекавых сродкаў. Валідацыя методык выпрабаванняў : ТКП 432-2012 (02041). – Введ. впервые. – Минск : Департамент фармацевт. пром-сти М-ва здравоохранения Респ. Беларусь, 2012. – 18 с.
  16. Валидация методики количественного определения флавоноидов в траве бодяка полевого / С. Р. Шамсутдинова, К.А. Пупыкина, Е. В. Красюк, Л. В. Старцева // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. – 2021. – Т. 24, № 6. – С. 36–41. – DOI: 10.29296/25877313-2021-06-05.

REFERENCES

  1. European Medicines Agency, Committee on Herbal Medicinal Products. Assessment report on Chamaemelum nobile (L.) All., flos. London, United Kingdom; 2010. p. 1–19
  2. Adamtsevich NIu, Boltovskii VS, Titok VV. Effect of extraction parameters on the yield of flavonoids from the leaves of the common sage (Lithospermum officinale L.). Vestsі Natsyianal'nai akademіі navuk Belarusі. Seryia bіialagіchnykh navuk. 2020;65(4):402–11. doi: 10.29235/1029-8940-2020-65-4-402-411. (In Russ.)
  3. Alvarez-Martínez FJ, Barrajon-Catalan E, Encinar JA, Rodriguez-Diaz JC, Micol V. Antimicrobial Capacity of Plant Polyphenols against Gram-positive Bacteria: A Comprehensive Review. Curr Med Chem. 2020;27(15):2576–606. doi:10.2174/0929867325666181008115650
  4. Aleksashina SA, Makarova NV. A comparative study of the antioxidant activity of phenolic compounds and flavonoids of small-leaved linden flowers (TiIia cordata Mill.), common sage (Salvia officinalis L.), sweet clover (Melilotus officinalis L.), currant leaves (Ribes nigrum folia), wild strawberry (Fragaria vesca L.), and grapes (Vitis labrusca) growing in the Samara region. Khimiia rastitel'nogo syr'ia. 2019;(3):153–9. doi:10.14258/jcprm.2019034623. (In Russ.)
  5. Bhatia N, Singh A, Sharma R, Singh A, Soni V, Singh G, et al. Evaluation of burn wound healing potential of aqueous extract of Morus alba based cream in rats. The Journal of Phytopharmacology. 2014;3(6):378–83. doi:10.31254/phyto.2014.3601
  6. Bhatia N, Kaur G, Soni V, Kataria J, Dhawan RK. Evaluation of the wound healing potential of isoquercetin-based cream on scald burn injury in rats. Burns Trauma. 2016;4:1–8. doi:10.1186/s41038-016-0032-1
  7. Pang Y, Zhang Y, Huang L, Xu L, Wang K, Wang D, et al. Effects and mechanisms of total flavonoids from Blumea balsamifera (L.) DC. on skin woundin rats. lnt J Mol Sci. 2017;18(12):2766–78.  doi:10.3390/ijms18122766
  8. Klimovich AA, Adamtsevich NIu, Ignatovets OS. Determination of optimal parameters for flavonoid extraction from the flower mass of Chamaemelum nobile (L.) All. Vestnik farmatsii. 2023;(3):30–8. doi: 10.52540/2074-9457.2023.3.30. (In Russ.)
  9. Zverev IaF. Flavonoids through the eyes of a pharmacologist. Features and challenges of pharmacokinetics. Obzory po klinicheskoi farmakologii i lekarstvennoi terapii. 2017;15(2):4–11. doi: 10.17816/RCF1524-11. (In Russ.)
  10. Adamtsevich NIu, Zakrzhevskaia EI, Fes'kova EV, Leont'ev VN, Titok VV. Development and validation of a method for the quantitative determination of flavonoids in the leaves of Lithospermum officinale (Boraginaceae). Rastitel'nye resursy. 2022;58(1):100–8. doi: 10.31857/S0033994622010034. (In Russ.)
  11. Dzhavakhian MA, Tokareva MG, Fadeev NB, Dul VN, Prozhogina IuE, Kalenikova EI. Development and validation of a method for quantitative determination of the amount of flavonoids in liquid and dry extracts of a plant composition. Voprosy obespecheniia kachestva lekarstvennykh sredstv. 2021;(2):12–22. doi: 10.34907/JPQAI.2021.26.35.003. (In Russ.)
  12. Kuz'menko AN, Nesterova OV, Suleimanova FSh, Matiushin AA, Krasniuk II. Modification of the method for quantitative determination of flavonoids in the herb of Canadian goldenrod (Solidago canadensis L.). Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriia 2. Khimiia. 2019;60(1):49–54. doi: 10.3103/s0027131419010061. (In Russ.)
  13. Protsenko MA, Kostina MA. Development and validation of a method for quantitative analysis of phenolic compounds and flavonoids in extracts from higher mushrooms. Khimiia rastitel'nogo syr'ia. 2015;(3):117–26. doi: 10.14258/jcprm.201503822. (In Russ.)
  14. Marakhova AI, Sorokina AA, Stani-shevskii IaM. Application of the principle of end-to-end standardization in the analysis of flavonoids of motherwort herb and preparations based on it. Razrabotka i registratsiia lekarstvennykh sredstv. 2016;(1):150–4. (In Russ.)
  15. Pharmaceutical Manufacturing. Validation of Test Methods : TKP 432-2012 (02041). Vved vpervye. Minsk, RB: Departament farmatsevt prom-sti M-va zdravookhraneniia Resp Belarus'; 2012. 18 s. (In Russ)
  16. Shamsutdinova SR, Pupykina KA, Krasiuk EV, Startseva LV. Validation of a method for the quantitative determination of flavonoids in Cirsium arvense herb. Voprosy biologicheskoi, meditsinskoi i farmatsevticheskoi khimii. 2021;24(6):36–41. doi: 10.29296/25877313-2021-06-05. (In Russ.)

 

Адрес для корреспонденции:

220006, Республика Беларусь,

г. Минск, ул. Свердлова, 13 а,

Учреждение образования

«Белорусский государственный

технологический университет»,

тел.:+ 375 44 771 81 61,

e-mail: anechkaf027@gmail.com,

Климович А.А.

Поступила 10.06.2025 г.