2023-1-33-42

УДК 615.32:615.01]:543.544

DOI: https://doi.org/10.52540/2074-9457.2023.1.33

А. А. Романюк¹, Д. В. Моисеев²

РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТРАЦЕНПРОИЗВОДНЫХ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО ПЛОДОВ МЕТОДОМ ВЭЖХ

¹Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет, г. Витебск, Республика Беларусь

²ООО «Компания «ДЕКО», г. Москва, Российская Федерация

Статья посвящена разработке и валидации методики количественного определения антраценпроизводных жостера слабительного плодов с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Изучено влияние на экстракцию биологически активных веществ жостера слабительного плодов природы экстрагента, температуры и продолжительности экстракции, соотношения массы сырья и объема экстрагента, а также измельченности растительного сырья. Определено, что экстракцию гликозидов антраценпроивзодных жостера слабительного плодов целесообразно проводить спиртом этиловым 50% в течение 30 минут на водяной бане при соотношении массы сырья и объема экстрагента 1 : 50.

В ходе исследования установлены оптимальные условия хроматографического определения антраценпроизводных жостера слабительного плодов. Хроматографический анализ осуществляется с помощью обращенно-фазовой колонки Zorbax SB-C18 (4,6 × 250 мм, 5 мкм), температура которой составляет 50 °С. Подвижная фаза состоит из ацетонитрила и воды высокоочищенной, доведенной кислотой ортофосфорной до значения рН 2. Используется градиентный режим элюирования подвижной фазы, скорость которой составляет 1 мл/мин.

Разработанная методика количественного определения антраценпроизводных жостера слабительного плодов валидирована по специфичности, линейности, правильности, точности, робастности. Определена стабильность раствора стандартного образца глюкофрангулина А и полученного экстракта.

Ключевые слова: жостера слабительного плоды, антраценпроизводные, высокоэффективная жидкостная хроматография, глюкофрангулин А, франгулин А.

SUMMARY

A. A. Romanyuk, D. V. Moiseev

DEVELOPMENT AND VALIDATION OF THE ASSAY METHOD OF ANTHRACENE DERIVATIVES OF COMMON BUCKTHORN FRUITS BY HPLC METHOD

The article is devoted to the development and validation of the assay method of anthracene derivatives of common buckthorn fruits using high performance liquid chromatography.

The effect on extraction of biologically active substances of common buckthorn fruits of the extractant character, temperature and duration of extraction, the ratio of the raw material weight and the extractant volume, as well as raw material granulation, was studied. It has been determined that it is reasonable to conduct glycosides extraction of anthracene derivatives of common buckthorn fruits with ethyl alcohol 50% for 30 minutes in a water bath at a ratio of raw materials weight and the extractant volume 1 : 50.

In the course of the study optimal conditions for the chromatographic determination of anthracene derivatives of common buckthorn fruits were established. A chromatographic analysis is carried out using a Zorbax SB-C18 reversed-phase column (4,6 x 250 mm, 5 µm) the temperature of which is 50 °C. The mobile phase consists of acetonitrile and highly purified water adjusted to pH 2 with orthophosphoric acid. A gradient elution mode of the mobile phase, the rate of which is 1 ml/min, is used.

The developed assay method of anthracene derivatives of common buckthorn fruits has been validated according to such parameters as specificity, linearity, correctness, accuracy and robustness. In addition, the stability of the solution of the standard sample of glucofrangulin A and the obtained extract was determined.

Keywords: common buckthorn fruits, anthracene derivatives, high performance liquid chromatography, glucofrangulin A, frangulin A.

ЛИТЕРАТУРА

1. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения / под ред. Г. П. Яковлева. – 2-е изд., испр. и доп. – Санкт-Петербург: СпецЛит, 2010. – 863 с.

2. Государственная фармакопея Республики Беларусь: (ГФ РБ II) : в 2 т. : введ. в действие с 1 июля 2016 г. приказом М-ва здравоохранения Республики Беларусь от 31.03.2016 г. № 270. – Т. 2: Контроль качества субстанций для фармацевтического использования и лекарственного растительного сырья / М-во здравоохранения Респ. Беларусь, Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении ; [под общ. ред. С. И. Марченко]. – Молодечно: Победа, 2016. – 1368 с.

3. Государственная фармакопея Российской Федерации: введ. в действие с 1 дек. 2018 г. приказом М-ва здравоохранения РФ от 31 окт. 2018 г. № 749 / М-во здравоохранения РФ. – 14-е изд. – Т. 4. – Москва: Медицина, 2018. – 7019 с.

4. Государственная фармакопея Республики Беларусь: в 2 т. : введ. в действие с 1 янв. 2013 г. приказом М-ва здравоохранения Респ. Беларусь от 25.04.2012 г. № 453. – Т. 1: Общие методы контроля качества лекарственных средств / М-во здравоохранения Респ. Беларусь, Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении ; [под общ. ред. А. А. Шерякова]. – Молодечно: Победа, 2012. – 1220 с.

5. Об утверждении Руководства по валидации аналитических методик проведения испытаний лекарственных средств [Электронный ресурс] : решение Коллегии Евразийской эконом. комис., 17 июля 2018 г., № 113. – Режим доступа: https://docs.eaeunion.org/docs/ru-ru/01421237/clcd_20072018_113. – Дата доступа: 27.05.2022.

6. Гармонизация методических подходов к стандартизации фармакопейных видов растительного сырья, содержащего флавоноиды / И. А. Самылина [и др.] // Фармация. – 2020. – Т. 69, № 5. – С. 5–11.

7. Эпштейн, Н. А. Исследование робастности при валидации методик ВЭЖХ и УЭЖХ: современный подход, включающий анализ рисков / Н. А. Эпштейн, В. Л. Севастьянова, А. И. Королева // Разработка и регистрация лекарственных средств. – 2018. – № 1. – С. 96–109.

8. Романюк, А. А. Изучение компонентного состава антрахинонов жостера слабительного плодов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [Электронный ресурс] / А. А. Романюк, Д. В. Моисеев // Актуальные вопросы современной медицины и фармации: материалы 71-й науч.-практ. конф. студентов и молодых учёных, Витебск, 24-25 апр. 2019 г. / под ред. А. Т. Щастного. – Витебск: Витебский гос. мед. ун-т, 2019. – С. 829–832. – 1 электрон. опт. диск (CD-ROM).

9. Кугач, В. В. Курс лекций по аптечной технологии лекарственных средств: курс лекций / Кугач В. В. – 4-е изд., перераб. и доп. – Витебск: Витебский гос. мед. ун-т, 2012. – 349 с.

REFERENCES

1. Iakovlev GP, redaktor. Pharmacognosy. Medicinal raw materials of plant and animal origin. 2-e izd, ispr i dop. Sankt-Peterburg,RF: SpetsLit; 2010. 863 s. (In Russ.)

2. Ministerstvo zdravookhraneniia Respubliki Belarus', Tsentr ekspertiz i ispytanii v zdravookhranenii. State Pharmacopoeia of the Republic of Belarus: v 2 t. Т. 2. Quality control of substances for pharmaceutical use and medicinal herbal raw materials. Marchenko SI, redactor. Molodechno, RB: Pobeda; 2016. 1368 s. (In Russ.)

3. Ministerstvo zdravookhraneniia Rossiiskoi Federatsii. State Pharmacopoeia of the Russian Federation. 14-e izd. T 4. Moskva, RF: Meditsina; 2018. 7019 s. (In Russ.)

4. Ministerstvo zdravookhraneniia Respubliki Belarus', Tsentr ekspertiz i ispytanii v zdravookhranenii. State Pharmacopoeia of the Republic of Belarus: v 2 t. Т. 1. General methods of quality control of medicines. Sheriakov AA, redactor. Molodechno, RB: Pobeda; 2012. 1220 s. (In Russ.)

5. On Approval of the Guidelines for the Validation of Analytical Methods for Testing Medicinal Products [Elektronnyi resurs] : reshenie Kollegii Evraziiskoi ekonom komis, 17 iiulia 2018 g, № 113. Rezhim dostupa: https://docs.eaeunion.org/docs/ru-ru/01421237/clcd_20072018_113. Data dostupa: 27.05.2022. (In Russ.)

6. Samylina IA, Moiseev DV, Marchenko SI, Veremchuk OA, Moiseeva AM, Sorokina AA. Harmonization of methodological approaches to the standardization of pharmacopoeial types of plant materials containing flavonoids. Farmatsiia. 2020;69(5):5–11. doi: 10.29296/25419218-2020-05-01. (In Russ.)

7. Epshtein NA, Sevast'ianova VL, Koroleva AI. Robustness study in the validation of HPLC and UPLC methods: a modern approach including risk analysis. Razrabotka i registratsiia lekarstvennykh sredstv. 2018;(1):96–109. (In Russ.)

8. Romaniuk AA, Moiseev DV. The study of the component composition of the anthraquinones of the laxative fruit joster by the method of high performance liquid chromatography [Elektronnyi resurs]. V: Shchastnyi AT, redactor. Aktual'nye voprosy sovremennoi meditsiny i farmatsii [CD-ROM]. Materialy 71-i nauch-prakt konf studentov i molodykh uchenykh; 2019 Apr 24-25; Vitebsk. Vitebsk, RB: Vitebskii gos med un-t; 2019. s. 829–32. (In Russ.)

9. Kuhach VV. Course of lectures on pharmaceutical technology of medicines: kurs lektsii. 4-e izd, pererab i dop. Vitebsk, RB: Vitebskii gos med un-t; 2012. 349 s. (In Russ.)

Адрес для корреспонденции:

210009, Республика Беларусь,

г. Витебск, пр. Фрунзе, 27,

УО «Витебский государственный ордена

Дружбы народов медицинский университет»,

кафедра организации и экономики фармации

с курсом ФПК и ПК,

тел. раб.: 8 (0212) 60-14-08,

е-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript.,

Романюк А. А.

Поступила 22.12.2022 г.